隨著分子生物學、蛋白質組學、藥物研發及環境科學的快速發展,對生物分子濃度和純度檢測的需求不斷增加。傳統分光光度計往往需要較大體積樣品、單通道檢測效率低,而NanoDrop系列則憑借“微量上樣、快速檢測”的優勢成為主流選擇。NanoDrop Eight作為多通道升級版,一次可同時檢測八個樣品,特別適合高通量研究和常規檢測。為了發揮其最大效能,合理規劃應用方案十分關鍵。
微量檢測
上樣量僅需1–2 μL,大大節約珍貴樣品。
表面張力保持液滴穩定,無需比色皿。
寬濃度范圍
核酸:2–27,500 ng/μL
蛋白質(BSA):0.06–200 mg/mL
通過自動光程調整實現從低濃度到高濃度的覆蓋。
高通量
八個光學通道可同步測定,提升檢測效率。
光譜范圍廣
190–850 nm波長覆蓋,適用于DNA、RNA、蛋白質、肽、多糖和其他小分子。
軟件支持
自動計算濃度與純度比值(260/280、260/230等)。
提供標準曲線建立和批量數據導出功能。
分子生物學:核酸提取、純度檢測、PCR前樣品質量控制。
蛋白質研究:蛋白定量、標簽蛋白檢測、復合物研究。
藥物開發:藥物分子結合實驗、制劑穩定性分析。
臨床與診斷:血清、細胞裂解液中的生物標志物檢測。
環境與食品科學:微生物污染監測、食品蛋白含量檢測。
目的:檢測DNA提取物的濃度和純度,保證后續PCR和測序質量。
步驟:
吸取1.5 μL DNA樣品滴加到平臺。
選擇“核酸”模式,輸入DNA選項。
儀器自動輸出濃度(ng/μL)及260/280、260/230比值。
結果判定:
260/280 ≈ 1.8 表示純度良好。
260/230 在2.0–2.2為最佳,過低說明有鹽或有機物殘留。
應用場景:轉錄組測序、基因表達分析。
注意事項:RNA極易降解,應在冰上操作并用RNase-free試劑。
質量判定:260/280 ≈ 2.0 為較純凈RNA。
可配制一系列標準DNA溶液,建立濃度–吸光度曲線,用于驗證儀器線性范圍。
檢測模式:280 nm吸收峰檢測。
適用樣品:細胞裂解液、血清、純化蛋白。
結果解讀:
260/280比值 ≈ 0.57 為純蛋白。
若比值升高,提示核酸污染。
NanoDrop快速測濃度,BCA法作平行驗證,提升結果可信度。
對于融合蛋白、熒光標簽蛋白,可通過全波段掃描分析特征吸收峰,判斷標簽是否成功結合。
對藥物或核酸樣品進行190–850 nm全波段掃描,判斷是否存在異常峰。
在190–230 nm區間可推測蛋白質構象變化。
分析藥物與DNA結合時吸收峰的移動或強度變化。
通過NanoDrop檢測藥物在不同緩沖液中的吸光度,推算溶解度。
觀察復合物形成前后光譜變化,判斷結合強度與位點。
長期監測藥物溶液在不同條件下的吸光度變化,評估穩定性。
提取水樣中的DNA/RNA,通過NanoDrop定量,快速評估污染水平。
應用于乳制品、大豆制品中蛋白含量檢測。
檢測食品樣品中可能存在的DNA或蛋白污染物。
標準化操作
嚴格控制樣品體積,統一上樣方式。
每批實驗都設置空白對照。
減少干擾因素
選擇合適緩沖液,避免高鹽、苯酚等干擾。
檢測平臺保持清潔,避免交叉污染。
提高重復性
每個樣品至少檢測兩次,取平均值。
多通道檢測時,保持移液一致性。
建立實驗數據庫
保存不同實驗的檢測曲線與結果,便于追溯與比較。
結果波動大
可能因氣泡或樣品未混勻,應離心后重新檢測。
260/230比值過低
緩沖液中可能殘留鹽類或苯酚,應重新純化。
樣品濃度過高
光程自動縮短仍飽和時,應稀釋樣品。
交叉污染
檢測平臺清潔不徹底,需用70%乙醇擦拭。
與自動化系統結合
NanoDrop Eight有望與機器人移液系統整合,實現全自動高通量檢測。
軟件智能化
借助AI算法分析光譜曲線,自動判定雜質來源與樣品質量。
多組學聯合檢測
未來可能與熒光檢測、質譜技術結合,形成跨平臺應用方案。
賽默飛分光光度計NanoDrop Eight憑借微量、快速和高通量的檢測特點,在核酸定量、蛋白質研究、藥物開發、環境監測和食品安全等多個領域展現出廣泛應用前景。通過合理設計應用方案,嚴格控制測試條件,并結合標準化操作,可以充分發揮其精確性與高效性。NanoDrop Eight不僅是一臺檢測工具,更是現代生物與化學實驗室中不可或缺的質量控制與科研助手。
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