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伯樂電穿孔儀 165-2660 是一款集高精度控制、模塊化結構與安全保護于一體的電穿孔系統。該設備通過瞬間高壓脈沖作用于細胞，使細胞膜形成可逆性微孔，從而實現外源 DNA、RNA、蛋白質等大分子的導入。
儀器設計適用于多種實驗體系，包括細菌、酵母、植物原生質體及哺乳動物細胞。其核心優勢在于輸出波形穩定、電壓控制精準、操作簡便且重復性高。為了保證實驗成功率，操作者需熟悉設備結構與標準操作流程，并嚴格遵守安全規范。
在使用前，操作者應了解電穿孔儀的基本結構與功能。伯樂 165-2660 系統主要由以下部分構成：
主控單元（Main Unit）
負責電能轉換與輸出控制，是儀器的核心部分。
內含微處理控制系統，可精確設定電壓、電容、電阻及脈沖時間。
ShockPod 電擊槽
放置電擊杯的部分，負責將高壓脈沖傳遞給樣品。
內置安全閉鎖開關，蓋未合上時無法啟動放電。
CE 模塊（電容擴展模塊）
用于擴展電容容量，調節時間常數與能量釋放速度，常用于指數衰減波模式。
PC 模塊（脈沖控制模塊）
調節輸出波形、電阻與脈沖時間，用于方波模式或多脈沖操作。
顯示與控制界面
前面板配有 LCD 顯示屏、功能按鍵與指示燈，用于參數設定和狀態監控。
電擊杯與連接線
電擊杯有 0.1 cm、0.2 cm、0.4 cm 三種規格，對應不同細胞類型與體積。
高壓連接線負責將能量安全傳遞至電擊槽。
實驗臺平穩、干燥，保持整潔，遠離高濕和易燃物。
環境溫度控制在 20–25 ℃，濕度不超過 80%。
確保實驗臺接地良好，電源電壓穩定在 220 V ±10%。
插座必須帶有獨立地線，且接觸可靠。
不得使用延長線或共用插座，以免電壓波動。
儀器背面接地端應接入實驗室防靜電系統。
檢查主機、電擊槽及模塊外觀是否完好。
確認電擊杯干凈、無裂紋、無導電殘留。
檢查風扇與散熱孔是否暢通。
插好電源線與連接線，確保接頭牢固。
通電后進行自檢，屏幕顯示“READY”方可進入設置。
細胞狀態：處于對數生長期，活性高，無污染。
緩沖液：使用低離子強度專用電穿孔緩沖液。
核酸溶液：DNA、RNA 或質粒溶液濃度適中，純度高。
混合比例：一般為樣品 9 份 + 質粒 1 份，混合后輕輕顛倒均勻。
避免氣泡：加入電擊杯后輕敲杯壁，使氣泡完全上浮。
將主控單元放在平穩臺面上，保證四腳平衡。
將 ShockPod 電擊槽通過專用線纜連接至主機前端接口。
若需使用 CE 或 PC 模塊，在斷電狀態下插入后背接口。
插入電源線并接通地線。
打開電源開關，系統自檢通過后即可使用。
注意：模塊插拔必須在斷電狀態下進行，切勿在通電時操作。
開機后進入主菜單，可選擇以下三種模式：
預設模式（Preset Protocol）：內置不同細胞類型的標準參數，適合新手使用。
手動模式（Manual Mode）：可自定義電壓、電容、電阻及脈沖時間。
用戶模式（User Protocol）：保存自定義程序以便重復使用。
使用方向鍵選擇模式后按“ENTER”確認進入。
選擇“指數衰減波”或“方波”。
指數衰減波常用于細菌、酵母；方波適合哺乳動物細胞。
使用上下鍵調整電壓值。
電壓范圍 10–3000 V，可按細胞類型選擇。
| 細胞類型 | 電場強度（kV/cm） | 推薦電壓（V） | 電擊杯間隙 |
|---|---|---|---|
| 大腸桿菌 | 1.8–2.5 | 1800–2500 | 0.2 cm |
| 酵母 | 1.0–1.5 | 1000–1500 | 0.2 cm |
| 哺乳動物細胞 | 0.3–0.8 | 300–800 | 0.4 cm |
使用 CE 模塊可在 25–3275 μF 范圍調節。
PC 模塊可設定電阻 50–1000 Ω 或選擇 ∞ 模式。
根據實驗類型靈活調節以控制能量釋放速率。
方波模式需設定持續時間（0.05–10 ms）和脈沖次數（1–10 次）。
多脈沖模式下，間隔一般設定為 3–5 秒。
將樣品加入電擊杯中，體積不超過容積的 80%。
檢查液面平整無氣泡。
打開 ShockPod 上蓋，放入電擊杯并對準電極。
蓋上安全蓋后，屏幕顯示“Cuvette Ready”。
按下“PULSE”鍵開始充電，待顯示“READY TO PULSE”后執行放電。
放電結束后，顯示屏顯示放電曲線及參數值。
等待約 5 秒，確認完全放電后取出電擊杯。
注意：放電過程中嚴禁觸碰儀器及電擊槽，防止高壓觸電。
迅速將電擊后的樣品加入預溫培養基中恢復。
對于細菌或酵母，恢復時間為 30 分鐘左右；哺乳動物細胞需 1–2 小時。
樣品恢復后可進行篩選、擴增或下游檢測。
電擊杯使用后用去離子水清洗干凈并晾干備用。
電擊前可將電擊杯及樣品短暫預冷，減少電弧發生率。
使用低鹽緩沖液能顯著提升穿孔成功率。
初次使用某細胞類型時應進行電壓梯度測試，以確定最優參數。
細胞密度和 DNA 濃度對轉化率影響顯著，建議記錄每次實驗數據以便優化。
多脈沖模式可提高轉染效率，但會降低細胞存活率，應平衡選擇。
實驗前確認電源開關處于關閉狀態后再連接線纜。
操作者需佩戴絕緣手套與防護眼鏡。
實驗臺面保持干燥，禁止液體接觸主機與接口。
放電時人員需站在儀器側方，避免正面對高壓區。
電弧閃光、異味或異常聲音出現時立即停止操作并切斷電源。
嚴禁在開機狀態下插拔模塊或打開電擊槽。
長時間連續工作后需停機 10 分鐘降溫。
實驗完成后，關閉主機電源，等待內部電容完全放電。
拔下電源線與模塊連接線。
用干布擦拭儀器表面，保持清潔。
將電擊槽與電擊杯分開晾干。
覆蓋防塵罩，將設備置于干燥通風處保存。
系統可自動保存最近一次實驗參數。
用戶可手動命名并存儲最多 50 組實驗程序。
通過 USB 接口可將實驗數據導出至電腦進行記錄與分析。
刪除舊程序時請確認已備份，以免數據丟失。
每周檢查主機和模塊接口是否松動。
每月清理風扇與散熱口，防止灰塵堵塞。
每半年進行一次輸出電壓校準，確保精度。
定期檢查高壓線是否老化或有破損。
若設備長時間閑置，每月通電運行 5 分鐘以維持電容性能。
| 問題 | 原因 | 解決方法 |
|---|---|---|
| 電弧放電或閃光 | 樣品含鹽或有氣泡 | 更換低鹽緩沖液，清除氣泡 |
| 電擊后無反應 | 蓋未閉合或參數未確認 | 檢查安全蓋并重新設定 |
| 轉化效率低 | 電壓不足或細胞狀態差 | 提高電壓或更換新鮮細胞 |
| 樣品死亡率高 | 電壓過高或時間過長 | 降低參數重新測試 |
| 屏幕無顯示 | 電源線松動或保險絲熔斷 | 重新插接或更換保險絲 |
| 模塊未識別 | 插頭松動或接口臟污 | 拔插重連并清潔接口 |
設備僅限經過培訓的實驗人員使用。
每次實驗前應由操作人填寫使用登記。
若設備出現異常，須立即報告管理員并暫停使用。
實驗室應設專人負責儀器維護與定期校準。
所有安全警示標簽必須保持清晰可見。
嚴禁私自拆開主機或更換內部零件。
針對細菌實驗
電壓較高、脈沖短；常用指數衰減波。
使用 0.2 cm 電擊杯，體積約 0.2 mL。
針對酵母實驗
需去除細胞壁或使用特殊緩沖液以提升導入率。
可使用方波模式，時間適度延長。
針對哺乳動物細胞
電壓較低，脈沖時間長；適合方波多脈沖模式。
加入恢復液可提高細胞存活率。
針對植物原生質體
樣品粘度大，應使用大間隙電擊杯并降低電壓。
適當延長放電時間。
伯樂電穿孔儀 165-2660 出廠前均經過嚴格檢測，整機質保三年，實行只換不修政策。為保持性能穩定，應遵守以下保養要求：
定期檢查接地線與保險絲。
使用原廠電擊杯及附件，避免不兼容問題。
每次實驗結束后清理殘留液體并覆蓋防塵罩。
不得將設備暴露于潮濕或高溫環境。
存放環境溫度 –10 至 55 ℃，濕度 ≤ 90%。
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