伯樂(Bio-Rad)Genepulser Xcell 電穿孔儀是一款高性能的電場控制與脈沖釋放系統(tǒng),廣泛應(yīng)用于細胞轉(zhuǎn)化、質(zhì)粒導(dǎo)入、RNA 干擾以及基因編輯實驗。其核心是精確、可重復(fù)的電場控制系統(tǒng),能夠在極短時間內(nèi)釋放穩(wěn)定的高壓脈沖,從而實現(xiàn)細胞膜瞬時電穿孔,促進外源分子進入細胞。該設(shè)備結(jié)合了數(shù)字化控制、反饋式電路調(diào)節(jié)以及多模式脈沖管理技術(shù),成為分子生物學(xué)實驗室的重要工具。
Genepulser Xcell 的設(shè)計理念在于實現(xiàn)“精準、靈活、安全、高效”的電轉(zhuǎn)化過程。它不僅提供豐富的參數(shù)調(diào)節(jié)范圍,還具有智能化的電場監(jiān)控功能,使得不同細胞類型都能在最優(yōu)條件下完成轉(zhuǎn)化。其電場控制系統(tǒng)的穩(wěn)定性與響應(yīng)速度,是決定轉(zhuǎn)化效率與細胞存活率的關(guān)鍵。
電穿孔是利用高強度瞬時電場在細胞膜上形成可逆性微孔,使外源 DNA、RNA 或蛋白質(zhì)等分子穿過細胞膜進入胞內(nèi)。當電場強度足夠大時,細胞膜兩側(cè)的電勢差導(dǎo)致脂質(zhì)分子排列發(fā)生變化,形成臨時通道。電場撤除后,細胞膜在一定時間內(nèi)恢復(fù)完整性。此過程的核心在于脈沖的電壓、時間和波形的精確控制。
Genepulser Xcell 的電場控制系統(tǒng)主要由以下部分組成:
高壓電源模塊:提供可調(diào)電壓源,輸出范圍廣,能夠滿足細菌、酵母、哺乳動物細胞等多類型樣品的電轉(zhuǎn)化需求。
電容充放電系統(tǒng):實現(xiàn)脈沖能量的存儲與瞬時釋放,確保電壓上升與下降過程平滑。
控制主板與微處理單元:用于信號采集、實時監(jiān)控、反饋調(diào)節(jié)與參數(shù)記錄。
監(jiān)測與安全保護模塊:包括過流保護、電弧抑制、溫度傳感及電極狀態(tài)檢測等。
界面與程序管理系統(tǒng):允許用戶自定義脈沖方案、保存參數(shù)并進行重復(fù)實驗。
Genepulser Xcell 的電源模塊采用精密高壓電源設(shè)計,能在毫秒級時間內(nèi)輸出穩(wěn)定脈沖。系統(tǒng)支持恒壓、恒場強兩種工作模式,電壓調(diào)節(jié)范圍通常為 10 V 至 2500 V。電源模塊配有高精度采樣電阻與反饋回路,以監(jiān)測電壓波形的實時變化,確保輸出電場的穩(wěn)定性。
電穿孔過程中,脈沖的能量來自電容的瞬時放電。Genepulser Xcell 內(nèi)部配置多組高品質(zhì)電解電容與固態(tài)繼電控制電路。充電階段電容被迅速充至設(shè)定電壓,放電階段通過放電電路向樣品池瞬時釋放能量。系統(tǒng)內(nèi)置多級放電路徑,可根據(jù)不同細胞類型自動調(diào)整放電速率與波形。
核心控制系統(tǒng)由微處理器(Microcontroller Unit)與高速模數(shù)轉(zhuǎn)換器(ADC)構(gòu)成。它實時監(jiān)測電壓、電流與電場變化,通過閉環(huán)反饋算法修正脈沖輸出誤差。系統(tǒng)每次放電前會自動校準內(nèi)部基準電壓,以消除因溫度或電源波動造成的誤差。這種反饋式控制使每個脈沖的波形更加一致,提高實驗可重復(fù)性。
Genepulser Xcell 配套多種電極腔體,如 cuvette 電極與電流檢測電極。接口采用低電阻鍍金設(shè)計,以減少能量損耗。設(shè)備內(nèi)部布線采用屏蔽結(jié)構(gòu),有效降低電磁干擾,確保脈沖信號的純凈度。電極溫度檢測器可實時監(jiān)控樣品溫升,避免高能脈沖導(dǎo)致的細胞損傷。
該系統(tǒng)內(nèi)置數(shù)字存儲單元,可自動記錄每次電穿孔的關(guān)鍵參數(shù),包括電壓峰值、脈沖持續(xù)時間、電流變化曲線等。用戶可通過液晶顯示屏或外接計算機讀取歷史記錄,實現(xiàn)條件優(yōu)化與溯源管理。部分版本還支持 USB 數(shù)據(jù)導(dǎo)出與軟件聯(lián)機分析功能。
Genepulser Xcell 的電場控制算法采用閉環(huán)設(shè)計。系統(tǒng)實時監(jiān)測輸出電場,并根據(jù)采樣數(shù)據(jù)動態(tài)調(diào)整輸出驅(qū)動信號,從而消除負載變化帶來的偏差。該算法的主要優(yōu)勢包括:
實現(xiàn)毫秒級電壓穩(wěn)定;
降低放電波形畸變;
提高脈沖重復(fù)一致性;
延長電極使用壽命。
電穿孔效果受波形影響極大。Genepulser Xcell 支持多種脈沖模式:
指數(shù)衰減脈沖:適用于細菌、酵母等具有堅固細胞壁的樣品;
方波脈沖:用于哺乳動物細胞和懸浮細胞;
多脈沖組合模式:通過間歇釋放多個低能量脈沖,提高轉(zhuǎn)化率同時降低細胞死亡率;
自定義波形模式:研究人員可手動設(shè)定電壓、間隔、脈沖數(shù)等參數(shù),實現(xiàn)針對性優(yōu)化。
控制系統(tǒng)通過電流監(jiān)測反饋可實時評估放電過程中的能量分布。當檢測到電弧或電阻突變時,系統(tǒng)會在微秒級內(nèi)中斷放電,保護樣品與設(shè)備安全。此動態(tài)調(diào)節(jié)功能確保在不同電導(dǎo)率樣品中均能獲得穩(wěn)定可控的電場。
Genepulser Xcell 的核心控制電路經(jīng)過精密校準,確保在連續(xù)實驗中輸出誤差小于 1%。這種高穩(wěn)定性使其成為標準化實驗的理想設(shè)備,特別適用于大型實驗室或商業(yè)化轉(zhuǎn)化流程。
電場強度、脈沖寬度及電容容量均可靈活調(diào)整,可用于大腸桿菌、酵母、昆蟲細胞、植物原生質(zhì)體以及哺乳動物細胞等多種類型。其可編程特性允許用戶根據(jù)不同細胞的電導(dǎo)率與膜特性自定義參數(shù)。
系統(tǒng)具備多重保護:當檢測到電極短路、過熱或電弧放電時,自動切斷輸出;電源模塊具有過壓與過流保護;同時支持接地檢測與電極鎖定設(shè)計,確保操作人員安全。
設(shè)備配備彩色 LCD 屏與菜單式操作界面。參數(shù)設(shè)置直觀明了,系統(tǒng)可自動保存常用方案并進行快速調(diào)用。部分型號還支持遠程監(jiān)控與參數(shù)導(dǎo)出,方便實驗記錄與數(shù)據(jù)分析。
設(shè)備外殼采用高絕緣材料,具備良好抗干擾性能。內(nèi)部散熱設(shè)計優(yōu)化,確保長時間運行穩(wěn)定。整機通過多項安全認證,符合實驗室設(shè)備電磁兼容與生物安全標準。
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化與基因?qū)?/strong>
適用于細菌、酵母及植物細胞的外源基因?qū)耄岣咿D(zhuǎn)化效率,減少細胞損傷。
RNA 干擾與基因編輯
在 CRISPR/Cas9、siRNA 傳遞等實驗中提供高效載體進入通道,尤其適合難轉(zhuǎn)染細胞系。
蛋白與納米顆粒導(dǎo)入
對某些非遺傳性分子,如熒光探針、納米載體的細胞內(nèi)傳遞同樣具有顯著效果。
電融合與細胞融合實驗
配合特殊電極可用于細胞融合及雜交瘤制備,通過控制脈沖形態(tài)實現(xiàn)高融合率。
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