賽默飛(Thermo Fisher Scientific)371型CO?培養箱是一款高精度細胞培養設備,廣泛應用于生命科學、醫學研究、藥物開發及組織工程等領域。該設備通過恒溫、恒濕與穩定的二氧化碳濃度,為細胞生長提供接近生理狀態的環境。其設計結構包括六面直熱加熱系統、自動濕度調節系統、HEPA空氣過濾循環系統以及高溫干熱滅菌模塊。
由于培養箱常年處于高濕、高溫、富含營養氣體的環境中,極易滋生細菌、真菌及霉菌孢子。若清潔不及時,污染將直接影響細胞培養結果,造成實驗失敗或交叉污染。因此,制定并嚴格執行標準化的清潔流程是保證實驗可靠性的前提。
(1)空氣與操作環境污染:實驗室空氣中存在微生物顆粒,開門取放樣品時隨氣流進入箱體內部。
(2)培養液蒸發與泄漏:培養液或試劑滴落到腔體底部,形成富含營養的污染源。
(3)操作人員攜帶污染:手套、器皿、培養皿等表面附著微生物,接觸腔體內壁時可能傳播。
(4)濕度盤水體污染:若長期不更換水或使用非滅菌水,微生物會在水盤內大量繁殖。
(5)過濾系統老化:HEPA濾芯使用時間過長會降低過濾效率,使污染物隨空氣循環進入腔體。
培養箱的清潔不僅關系到實驗數據的準確性,更直接影響細胞存活率和實驗安全性。
定期清潔可防止霉菌孢子和細菌形成生物膜。
有助于保持CO?傳感器精度與氣體流通順暢。
延長設備使用壽命,避免內部部件腐蝕。
確保高溫滅菌功能的有效執行。
在正式清潔前,需明確以下四項基本原則:
先斷電后操作:清潔前務必關閉電源、氣源并拔掉插頭,防止電擊與元件損壞。
先外后內、先上后下:清潔順序從外部表面到內部腔體,從頂部至底部,避免污水回流污染。
區分干濕清潔階段:先進行干式清理以去除固體殘留,再進行濕擦與化學消毒。
禁止使用強酸強堿:所有清潔劑應為中性或弱堿性,以防腐蝕不銹鋼內腔與傳感器。
停機與冷卻
關閉培養箱電源并切斷CO?氣源。
若設備近期使用過高溫滅菌功能,應等待腔體自然降溫至室溫。
移除內部物品
取出所有培養皿、瓶、架及水盤,并記錄擺放順序。
將樣品轉移至備用培養箱或低溫保存裝置中。
防護與清潔用品準備
穿戴實驗服、手套、口罩與防護眼鏡。
準備無纖維布、無塵紙、噴瓶、70%乙醇或異丙醇、無離子水、滅菌蒸餾水。
若需深度清潔,可準備低殘留中性洗滌劑溶液(稀釋濃度0.5–1%)。
機體外殼
用微濕的軟布蘸取中性清潔劑,沿同一方向擦拭外殼表面。
注意通風口及接縫處的灰塵積聚,可使用軟毛刷輕輕清理。
避免清潔液流入控制面板或通電接口。
控制面板與顯示屏
使用70%乙醇輕拭表面,不可直接噴灑。
檢查按鍵靈敏度及顯示狀態,確認無殘留液體。
拆卸內部部件
取出擱板、托架、導氣罩、水盤及傳感器保護罩。
按順序編號放置,便于清潔后復原。
初步清除污染物
使用無塵布擦去腔體內的水漬、培養液殘留或雜質。
對積垢部位可用溫水浸泡后擦拭。
中性洗滌劑清潔
將稀釋后的洗滌液噴灑在內壁、角落及擱板上。
靜置3–5分鐘后用濕布反復擦凈,確保不留化學殘留。
清水漂洗
用無離子水或滅菌水擦拭至少兩遍,徹底去除殘留清潔劑。
確保每次擦拭布為干凈狀態,避免交叉污染。
酒精消毒
使用70%乙醇或異丙醇擦拭整個內壁及配件。
重點處理門密封條、轉角、風道入口及CO?噴嘴。
靜置自然風干,不使用加熱烘干方式,以免殘留酒精蒸汽引燃。
清洗水盤
倒掉殘余水,使用中性洗滌液清洗表面后沖凈。
用乙醇再次擦拭,并以滅菌水漂洗干凈。
水質管理
推薦使用滅菌蒸餾水或高純去離子水,不得使用自來水。
每周更換一次水,防止微生物滋生。
檢查蒸發表面
確認水盤底部無沉淀、無粘附污染物。
若發現銹斑或白色水垢,可使用檸檬酸溶液輕微擦拭,再以清水漂凈。
檢查過濾器狀態
若設備帶有HEPA循環模塊,需觀察濾芯是否積塵或變色。
一般建議每6個月至1年更換一次。
風道清潔
關閉風機后,用無塵布擦拭風口區域。
禁止用強力氣流吹掃,以免損傷風機軸承。
重裝前確認
濾網干燥后重新安裝,確保密封圈完好。
檢查風機運轉聲音是否平穩。
內外門玻璃
使用無纖維布和酒精輕擦,不可使用含氨清潔劑。
清潔后用干布擦干防止水印殘留。
密封圈
取下硅膠門封條,用溫水及中性洗劑清洗,徹底擦干。
檢查密封圈是否有破損或老化,必要時更換。
門內加熱裝置檢查
確保加熱線未被液體浸濕。若有水漬,需完全干燥后再通電。
CO?傳感器
若為熱導型傳感器,禁止使用液體清潔,應使用干凈棉簽輕拭表面灰塵。
每半年進行一次校準,以保證測量精度。
氣體接口
檢查進氣口是否有雜質或水汽。
用干燥空氣吹凈接口,確認密封圈完好無裂紋。
管路檢查
若CO?供氣管出現水汽回流,應立即斷開并更換干燥過濾器。
自然干燥
清潔完畢后保持門開啟狀態,待內部完全干燥。
不可使用外部加熱源或吹風機。
執行高溫滅菌程序
關閉門體,開啟Steri-Cycle高溫滅菌模式。
滅菌溫度140℃,持續時間約14小時。
滅菌結束后自動冷卻,直至腔體溫度恢復常溫。
滅菌驗證
檢查控制面板確認滅菌流程完成且無報警信息。
若有溫度異常或程序中斷,應重新運行滅菌程序。
組件復裝
按清潔前編號順序裝回擱板、托架、風道罩與水盤。
確認所有部件牢固、平整。
電氣與氣源連接
插入電源插頭并開啟總電源。
重新連接CO?氣瓶,檢查壓力表是否穩定。
功能測試
設定溫度37℃、CO?濃度5%,運行24小時。
觀察溫度、濕度及氣體濃度穩定性。
若數據恢復正常且無報警,說明清潔與滅菌效果良好。
| 清潔項目 | 建議頻率 | 操作說明 |
|---|---|---|
| 外部擦拭 | 每周一次 | 用酒精或中性洗劑清潔外殼及控制面板 |
| 內部清潔 | 每月一次 | 拆除擱板、水盤全面擦拭消毒 |
| 濕度水更換 | 每周一次 | 使用滅菌水并徹底沖洗水盤 |
| HEPA濾芯檢查 | 每6個月 | 根據運行環境決定更換周期 |
| CO?傳感器校準 | 每6個月 | 使用標準氣體進行校準 |
| 高溫滅菌 | 每1–2個月 | 根據實驗頻率調整周期 |
通過科學的周期管理,能有效防止生物膜形成和氣體傳感器漂移,保持培養環境長期穩定。
清潔過程中避免金屬刷、粗糙海綿等硬質工具,以防刮傷不銹鋼腔體。
清潔劑不得含氯或氨成分,避免腐蝕及殘留氣味。
若發現培養液泄漏到電加熱元件周圍,應立即斷電并聯系專業人員檢修。
滅菌程序運行時嚴禁開啟箱門或斷電,以免造成系統異常。
所有清潔布、棉簽和手套均應為一次性使用,防止交叉污染。
清潔結束后應記錄清潔日期、操作人及檢查人,建立可追溯檔案。
| 問題表現 | 可能原因 | 解決方法 |
|---|---|---|
| 清潔后出現異味 | 殘留洗劑或未完全干燥 | 用滅菌水再次擦拭并自然通風 |
| 滅菌程序報警 | 溫度傳感器受污染或接觸不良 | 清潔傳感器并重啟程序 |
| 濕度異常下降 | 水盤未裝好或加水不足 | 檢查水位并重新安裝 |
| CO?濃度波動 | 傳感器污染或管路漏氣 | 清潔傳感器并檢測氣體接口 |
建立清潔檔案
對每次清潔、滅菌及維護記錄日期、操作人、使用清潔劑類型、耗時及檢測結果,形成完整檔案以供追蹤。
環境控制
保證實驗室空氣潔凈度,避免灰塵及微生物過度進入??諝膺^濾系統應定期維護。
合理使用設備
避免長期滿負荷運行,培養皿間保持通風間距。
定期培訓人員
操作人員應熟悉清潔流程及安全守則,掌握應急處理方法。
專業檢修與年度保養
每年至少進行一次由專業工程師執行的全面維護,包括電氣系統、加熱元件、傳感器、過濾裝置的檢測與更換。
在完成清潔與滅菌操作后,為確保設備內環境符合生物培養要求,應進行以下驗證步驟:
微生物檢測
使用培養皿暴露法或拭子采樣,對腔體內壁及水盤區域進行檢測。若菌落數為零,說明滅菌徹底。
空氣潔凈度檢測
開啟循環風機后使用塵埃粒子計數儀檢測空氣潔凈度,應符合ISO 5級標準。
溫濕度穩定性測試
連續記錄24小時內溫濕度波動,應分別控制在±0.3℃和±3%RH以內。
氣體濃度穩定性
測試CO?濃度恢復速度,應在15分鐘內恢復至設定值并保持穩定。
若上述指標均達標,即可正式投入實驗使用。
賽默飛371型CO?培養箱作為高精度生物培養設備,其清潔流程不僅是維護設備性能的必要環節,更是實驗室質量控制的重要組成部分。規范的清潔流程能有效防止交叉污染,延長設備壽命,保障細胞培養環境的穩定性。
通過建立科學的周期性維護制度、嚴格執行操作標準、強化人員培訓與記錄管理,可將污染風險降至最低。只有在“清潔、滅菌、維護”三環合一的體系下,才能充分發揮371培養箱的高性能優勢,為科研工作提供長期穩定的支持。
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